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两种不同的总蛋白提取方法总结
蛋白质提取与制备蛋白质种类很多,性质上的差异很大,既或是同类蛋白质,因选用材料不同,使用方法差别也很大,且又处于不同的体系中,因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。本文分别介绍了从新鲜样品中提取总蛋白和从Trizol裂解液中分离总蛋白的方法和步骤。
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考马斯亮蓝染色原理
考马斯亮蓝染色法也称考马斯蓝法(coomassie blue staining)又称Bradford法。是测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。由于其突出的优点,正得到越来越广泛的应用。下面就着重介绍下考马斯亮蓝染色法原理。
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bca法测蛋白浓度步骤
bca法是常用蛋白浓度测定方法之一。其他蛋白浓度测定方法还有考马斯亮蓝法、bradford法测蛋白浓度等。本文是用bca法测定蛋白浓度。是使用索莱宝BCA蛋白浓度测定试剂盒完成本实验。
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转铁蛋白应用
转铁蛋白(Transferrin) Cas;11096-37-0 转铁蛋白是血液中一种主要的糖蛋白, 负责将肝组织(是铁贮藏的主要场所)的铁向其它组织的细胞运输。没有结合铁的转铁蛋白称作脱铁转铁蛋白(apotransferrin), 它能够紧紧结合两个Fe3 , 此时称为铁结合转铁蛋白(ferrotransferrin)。所有生长中的细胞表面都有铁结合转铁蛋白的受体,在中性pH条件下转铁蛋白与铁结合, 然后通过内吞作用进入细胞。在细胞内,在内体的酸性环境下, 转铁蛋白释放出铁, 但是仍与膜受体结合在一起, 并与受体一同回到质膜。当细胞外环境变成中性时, 转铁蛋白同受体脱离,并自由地结合铁, 然后又开始新一轮循环。实际上, 转铁蛋白穿梭于细胞外液体和内体之间, 避开了溶酶体, 快速传递细胞生长所需的铁。
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蛋白marker发展史
蛋白分子量标准,常称之为蛋白Marker。在免疫印迹(Western blot)试验中,分子量Marker虽不起眼,但意义重大,是阳性对照,是大小的标准,是必须的。只有Marker精确无误了,实验结果才有说服力。除此之外,蛋白Marker还能够提示电泳是否正常,转移是否成功等信息。