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细胞学实验
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共培养/迁移/侵袭检测技术服务
细胞迁移是指细胞在接收到内源或外源迁移信号后而产生的移动。细胞迁移是通过胞体形变进行的缓慢的定向移动,涉及细胞觅食、伤口痊愈、胚胎发生、免疫反 应、感染和癌症转移等生理现象。因此通过对细胞迁移的研究,对阻止癌症转移、异体植皮等医学应用方面具有一定意义。 细胞侵袭实验是研究肿瘤细胞对基质膜 消化后的迁移运动,肿瘤细胞须经血管基底膜穿入深面间质后才能侵袭组织和转移至远处。
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shRNA慢病毒表达载体构建
siRNA直接转染细胞可以方便的实现瞬时基因沉默,通常持续时间在3-7天左右,因目标基因差异而定,但是转染效率极低。对于一些半衰期长的蛋白,要想观察蛋白表达下降对细胞表型的长期影响就需要长期研究目标基因沉默的效果,shRNA表达载体是更适合的选择。
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流式凋亡、周期检测
细胞凋亡(Cell apoptosis)是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主动过程,它 涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用,它并不是病理条件下的损伤,而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。 细胞周期(Cell Cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,细胞的遗传物质复制并均等地分配给两个子细胞。细胞周期分为间期与分裂期两个阶 段。间期又分为三期:即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。某些细胞在分裂结束后暂时离开细胞周期,停止细胞分 裂,执行一定生物学功能(G0期)。
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MTT/CCK8检测1
CCK-8(Cell Counting kit-8)试剂中含有WST–8:化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐], 它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物(Formazan),生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比,可采用酶联 免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值,间接反映活细胞数量。