共培养/迁移/侵袭检测技术服务

细胞迁移是指细胞在接收到内源或外源迁移信号后而产生的移动。细胞迁移是通过胞体形变进行的缓慢的定向移动，涉及细胞觅食、伤口痊愈、胚胎发生、免疫反 应、感染和癌症转移等生理现象。因此通过对细胞迁移的研究，对阻止癌症转移、异体植皮等医学应用方面具有一定意义。 细胞侵袭实验是研究肿瘤细胞对基质膜 消化后的迁移运动，肿瘤细胞须经血管基底膜穿入深面间质后才能侵袭组织和转移至远处。

shRNA慢病毒表达载体构建

siRNA直接转染细胞可以方便的实现瞬时基因沉默，通常持续时间在3－7天左右，因目标基因差异而定，但是转染效率极低。对于一些半衰期长的蛋白，要想观察蛋白表达下降对细胞表型的长期影响就需要长期研究目标基因沉默的效果，shRNA表达载体是更适合的选择。

流式凋亡、周期检测

细胞凋亡（Cell apoptosis）是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同，细胞凋亡不是一件被动的过程，而是主动过程，它 涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，它并不是病理条件下的损伤，而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。 细胞周期（Cell Cycle）是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程，细胞的遗传物质复制并均等地分配给两个子细胞。细胞周期分为间期与分裂期两个阶 段。间期又分为三期：即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）与DNA合成后期（G2期）。某些细胞在分裂结束后暂时离开细胞周期，停止细胞分 裂，执行一定生物学功能（G0期）。

MTT/CCK8检测1

CCK-8（Cell Counting kit-8）试剂中含有WST–8：化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐]， 它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物（Formazan），生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比，可采用酶联 免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，间接反映活细胞数量。

载体构建

质粒载体可以有效地运载外源基因片段进入受体细胞，可以独立自主大量复制并且很容易从宿主细胞中分离纯化，因而在分子生物学使用十分广泛。常用的载体可分为克隆载体和表达载体，根据载体进入受体细胞的不同，分为原核细胞表达载体、真核细胞表达载体以及穿梭载体

甲基化检测

高通量SNP位点分型

Taqman探针 服务

荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物，探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交探针（荧光共振能量传递探针）和分子信标Molecular Beacon。

实时荧光定量PCR(Taqman探针法)

实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR）技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该技术结合了实时定量PCR仪、实时荧光定量试剂、通用电脑和自动分析软件，构成PCR-DNA/RNA实时荧光定量检测系统。

SYBR Green 染料法（mRNA）---三复孔

实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR）技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该技术结合了实时定量PCR仪、实时荧光定量试剂、通用电脑和自动分析软件，构成PCR-DNA/RNA实时荧光定量检测系统。